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影響色譜柱性能的因素有哪些

發布時間:2022-08-15        閱讀:533
  色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環)、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。
  只有了解影響色譜柱性能的因素,才能結合目標分析物的性質、需要達到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。
  (1) 硅膠純度
  硅膠純度和殘留金屬離子濃度,硅膠的雜質會影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發生拖尾。
  (2) 色譜柱尺寸
  填料床的長度和內徑,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會升高壓力和導致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會增加橫向擴散,同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節約溶劑,可減少橫向擴散,但壓力較大,對系統要求較高。
  (3) 顆粒形狀及粒徑
  球形顆粒柱效高、重現性好、柱床結構均勻,不規則形柱床結構不均勻、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。
  (4) 顆粒表面積
  顆粒外表面和內部孔表面的總和,以m2/g表示,相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態,更適合梯度洗脫程序。
  (5) 孔徑
  顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍是80~300Å,大孔徑的填料顆??梢匝娱L大分子溶質在填料表面的滯留時間,改善分離,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。
  (6) 鍵合類型及鍵合
  鍵合相分子與基體單點相連為單體鍵合,這種鍵合方式可以提高傳質速率,縮短柱平衡時間,;聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點相連,這種鍵合方式可以增加色譜柱穩定性,增加載樣量。而鍵合相不同會直接影響化合物的保留行為。
  (7) 碳覆蓋率
 碳覆蓋率可以提高分辨率和重現性,但分析時間長。
  (8) 封端
  硅膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留硅羥基,如圖封端可以減輕待測組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應,改善保留和峰行,這對于堿性化合物尤其重要。而不同的封端技術也會直接影響色譜柱的效能。

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