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使用液相色譜進行定量分析時常采用哪種方法?

發布時間:2022-10-12        閱讀:606
標準曲線法,分為外標法和內標法。外標法在液相色譜中用的較多。內標法準確但是麻煩,在標準方法中用的較多。

1、外標法
用被測化合物的純品作為標準樣品,配制成一系列的已知濃度的標樣。注入色譜柱的到其響應值(峰面積)。
在一定范圍內,標樣的濃度與響應值之間存在較好的線性關系,即W=f×A,制成標準曲線。
在*相同的實驗條件下,注入未知樣品,得到欲測組分的響應值。根據已知的系數f,即可求出欲測組分的濃度。
外標法的優點:
操作、計算簡單,是一種常用的定量方法;無需各組分都被檢出、洗脫;需要標樣;標樣及未知樣品的測定條件要一致;進樣體積要準確。
外標法缺點:
實驗條件要求高,如檢測器的靈敏度,流速、流動相組成的不能發生變化;每次進樣體積要有好的重復性。
 
2、內標法
操作:
將已知量的內標樣加入標準樣品,制成混合標樣,并配制一系列的已知濃度的工作標樣?;旌蠘藰又袠藰优c內標樣的摩爾比不變。注入色譜柱,以(標樣峰面積/內標樣峰面積)為響應值。根據響應值與工作標樣濃度之間存在的線性關系,即W=f×A,制成標準曲線。
將已知量的內標樣加入未知樣品,注入色譜柱,得到欲測組分的響應值。根據已知的系數f,即可求出欲測組分的濃度。
內標法的特點:
操作過程中樣品和內標是混合在一起注入色譜柱的,因此只要混合溶液中被測組分與內標的量的比值恒定,上樣體積的變化不會影響影響定量結果。內標法抵消了上樣體積,乃至流動相、檢測器的影響,因此比外標法精確。

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