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什么是超高效液相色譜儀?它該如何操作?

發布時間:2022-09-26        閱讀:82
  超高效液相色譜儀是基于高效液相色譜法的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。主要用于各種藥物及其制劑的分析測定,尤其是生物樣品、中藥等復雜體系的成分的分離分析,可對物質進行定量定性分析。超高效液相色譜儀的速度、靈敏度及分離度分別是傳統的高效液相色譜儀的9倍、3倍及1.7倍,它縮短了分析時間,同時減少了溶劑用量降低了分析成本。  
 
  目前,超高效液相色譜儀是應用超高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備??蓮V泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。
 
  超高效液相色譜儀主要優點:
  1.單一波長標準靈敏度、高靈敏度吸收譜。
  2.自動測定D2燈及W燈的開啟次數、燈狀態、燈點燃時間、燈能量、設定D2燈及W燈狀態。
  3.針對復雜混合物中各化合物在不同波長下的響應差異,用時間程序切換波長進行分析,與傳統紫外-可見檢測器相比,能夠極大程度提高所有化合物的測定靈敏度。
  4.超高效液相色譜儀采用進口光電二極管陣列作為光電檢測元件,無需任何機械部分調整、選擇和改變波長,儀器使用過程中不會引起波長的改變,與常規的單色儀相比有良好的波長準確度和重現性,使得分析結果更加可靠。
 
  超高效液相色譜儀的操作步驟:
  1.過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜(0.45um)。
  2.對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
  3.打開HPLC工作站,連接好流動相管道,連接檢測系統。
  4.進入HPLC控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。
  5.有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵,直接在泵的出水口,用針頭抽取。沖洗進樣閥,需要在manual菜單下,先點擊purge,再點擊start,沖洗時速度不要超過10ml/min。
  6.調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。點擊injure,選用合適的流速,點擊on,走基線,觀察基線的情況。
  7.設計走樣方法。點擊file,選取select users and methods,可以選取現有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法,點擊new method。選取需要的配件,包括進樣閥,泵,檢測器等,根據需要而不同。選完后,點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括:
 ?、龠M樣前的穩流,一般2-5分鐘;
 ?、诨€歸零;
 ?、圻M樣閥的loading-inject轉換;
 ?、茏邩訒r間,隨不同的樣品而不同。
  8.進樣和進樣后操作。選定走樣方法,點擊start。進樣,所有的樣品均需過濾。方法走完后,點擊postrun,可記錄數據和做標記等。全部樣品走完后,再用上面的方法走一段基線,洗掉剩余物。
  9.關機時,先關計算機,再關液相色譜。

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